一、活動時間：2024.9.1~12.31

二、活動詳情：

NanoLuC螢光素酶報告基因載體

目前已構建多種類型的NanoLuc螢光素酶報告基因載體，以滿足不同的實驗需求。非融合的Nluc提供了最大的光輸出和靈敏度；NanoLuc-PEST(NlucP)將蛋白表達水平變化與轉錄活性改變密切偶聯(lián)，并增加信噪比；融合N-末端分泌信號(secNluc)的NanoLuc螢光素酶適用于分泌型報告基因試驗。使用Nano-Glo螢光素酶檢測試劑，發(fā)光量在跨越1,000,000倍的酶濃度范圍內呈線性關系，且信號半衰期≥2小時。

為滿足利用報告基因研究轉錄調控，我們提供多種表達不同類型NanoLuc螢光素酶(非融合型Nluc,PEST不穩(wěn)定型NlucP,分泌型secNluc)的質粒載體。不同的pNL載體用途如下：

·pNL1:克隆已知或預測的啟動子區(qū)域

·pNL2:克隆已知或預測的啟動子區(qū)域，并通過潮霉素(Hygromycin)篩選建立一個穩(wěn)定克隆的細胞系

·pNL3:克隆不需要基本啟動子的結合位點或應答原件(如pNL3.2.NF-KB-RE載體)

此外，還提供非融合和分泌型Nluc對照質粒。pNL載體系列以pGL4為基礎設計，以方便從現(xiàn)有的質粒上進行序列轉移。載體骨架設計還去掉了許多轉錄因子結合位點和其他潛在的調控元件以減少反常結果的發(fā)生。對Nluc基因突變體進行了密碼子優(yōu)化，并去除了許多潛在調控元件或其他不必要的功能(如常見的限制性內切酶位點)。

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